本发明提供了一种斐林氏溶液以及糖蜜中总糖的测定方法，解决了现有技术中需先进行预滴定，检验时间偏长的技术问题。它包括A溶液和B溶液，所述B溶液以1000mL计：含酒石酸钾钠364g，氢氧化钠100g，亚铁氰化钾10g‑20g，余量为水。本发明的斐林氏溶液，应用其进行单糖滴定检测，取消了次甲基蓝指示剂的加入，并且取消了预滴定，直接进行滴定，减少了操作步骤，都节约了检验时间；滴定终点为蓝色刚好褪去，溶液颜色变为土黄色，蓝色褪去瞬间溶液变为土黄色，终点容易观察，且不会返色；实验精度和准确度均得到明显提高。