本发明属于生物工程技术领域。本发明涉及一种猫细小病毒重组蛋白，该猫细小病毒重组蛋白包含猫细小病毒(FPV)抗原的两个优势表位，为提高该重组蛋白在原核表达系统中的产量，采用大肠杆菌偏爱密码子将该重组蛋白氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列，化学合成该核苷酸序列并构建重组表达载体。本发明还涉及该猫细小病毒重组蛋白单克隆抗体的制备，经过免疫、细胞融合及多轮筛选后得到杂交瘤细胞株，纯化单克隆抗体并分别标记胶体金颗粒，通过正交实验确定最佳单抗配对组合，可用于猫细小病毒感染的早期诊断。