本发明公开了干细胞的冷冻液及其冷冻方法，包括培养液与冷冻液，其特征在于，培养液为DMEM/F12培养液，冷冻液包括二甲基亚砜、总黄酮、土豆粉提取物、人血清白蛋白、樱桃提取物、棕榈油提取物、小牛血清、海藻糖、链霉素和胰蛋白酶；本发明的冻存液结合传统冻存液配制方法，在原有的基础上进行了改进，降低了二甲基亚砜的用量，新添加了总黄酮，活化细胞的功能，具有抗氧化衰老的作用；本发明的所使用的冻存液与现有技术相比，提高了脂肪干细胞的复苏比例，以及脂肪干细胞的生长成本；在冻存液中加入甘油，甘油对细胞起到保湿，同时可提供细胞生存所需要的部分能量。