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专利名称IL-6重组单克隆抗体及其制备方法和应用
申请日2019-11-13
申请号/专利号CN201911111871.X
专利权人武汉华美生物工程有限公司
申请人武汉华美生物工程有限公司
发明人/设计人郑雪松;华权高;沈鹤霄;罗绍祥;陈莹;谭华菊;舒芹
公告日2020-01-07
公告号CN110655576A
法律状态审中
专利类型发明
行业分类信息技术

摘要

本发明提供了一种IL‑6重组单克隆抗体的制备方法,其包括如下步骤:以IL‑6免疫小鼠,免疫完成后取小鼠的脾脏,制成单细胞悬液;通过流式细胞仪筛选出记忆B细胞及浆细胞;对所得细胞进行分别培养,再将所得培养物上清液加入到包被IL‑6的培养装置继续培养,检测出分泌特异性抗体的细胞株,筛选出可以特异性识别抗原蛋白的抗体克隆;对所得细胞株进行总RNA的抽提,并反转录成cDNA,扩增抗体重链和轻链的可变区,分别连接至载体;然后进行细胞转染,生产IL‑6重组单克隆抗体。本发明可以通过一次筛选获得大量的抗体序列,可以获得抗体的基因信息,解决了杂交瘤技术中的细胞融合率低以及抗体基因丢失的问题。
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