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专利名称一种利用氨基酸脱氨酶生产α-酮-β-甲基正戊酸的方法
申请日2019-11-08
申请号/专利号CN201911088054.7
专利权人江南大学;无锡宸明生物技术有限公司
申请人江南大学;无锡宸明生物技术有限公司
发明人/设计人刘立明;刘佳;袁宇翔;宋伟;罗秋玲;高聪;叶超;陈修来
公告日2020-01-03
公告号CN110643585A
法律状态审中
专利类型发明
行业分类生物工程

摘要

本发明公开了一种利用氨基酸脱氨酶生产α‑酮‑β‑甲基正戊酸的方法,属于生物工程技术领域。本发明是在氨基酸脱氨酶突变体Pm‑LAAD*的基础上,利用构象动力学的方法进行蛋白质工程改造,获得新的突变体Pm‑LAAD*(V411A/T414A),其稳定性显著提高,50℃下半衰期从8h增加至10h,4℃冷藏保存的半衰期从150h上升至240h。该酶经过改造后,转化体系中不添加任何缓冲剂,转化通气量仅为0.2vvm,转化体系中添加湿细胞添加量15g/L,转化12h,L‑异亮氨酸摩尔转化率达到95%以上,产量达到98.0g/L,下游纯化简易,极大地降低了生产成本,能够满足工业化需求。
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