本发明公开了一种利用Y家族聚合酶Rev1调节酿酒酵母氧胁迫的方法，属于生物工程技术领域。通过同源重组的方法敲除基因REV1，构建敲除菌株rev1Δ，使得酵母菌株抗氧化胁迫能力降低，具体表现为胁迫条件下敲除菌株生物量降低9％，存活率降低34.8％，基因突变频率降低63.8％，丙酮酸产量降低30.8％。利用pY26质粒过表达基因REV1，构建过表达菌株rev1Δ/REV1，使得菌株抗氧化胁迫能力增强，具体表现为生物量提高8.3％，存活率提高11.5％，基因突变频率提高186.2％，丙酮酸产量提高57.7％。上述结果表明Rev1可以提高酵母菌株在氧胁迫条件下的生存能力和发酵性能。