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专利名称一种石蜡包埋样本中蛋白质的提取及检测分析方法
申请日2019-08-28
申请号/专利号CN201910804757.9
专利权人武汉金开瑞生物工程有限公司
申请人武汉金开瑞生物工程有限公司
发明人/设计人陈亚运;华权高;李立;赵海义;鲁思琴;李如萍;舒芹;张雪娇
公告日2019-11-26
公告号CN110501437A
法律状态审中
专利类型发明
行业分类生物工程

摘要

本发明具体涉及一种石蜡包埋样本中蛋白质的提取及检测分析方法。本发明采用丙酮沉淀法,充分裂解后的蛋白溶液加入冷丙酮和30mMDTT,涡旋混匀,‑20℃沉淀,离心时去掉上清后采用质谱更兼容的溶液重悬蛋白,SDS等表面活性剂能够和蛋白结合,丙酮沉淀蛋白时会一起沉淀下来,所以丙酮沉淀一次只能去掉部分的SDS,待重悬的蛋白进行还原烷基化后,再次加入冷丙酮和10mMDTT,‑20℃沉淀,离心去掉上清后再次采用质谱更兼容的溶液重悬蛋白,经过两次丙酮沉淀与裂解液重悬置换,SDS对后续实验的影响基本消除,并且每个样品只需3ml左右的丙酮,成本大约0.1元,相较于超滤管,节省了更多成本。
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