本发明公开了一种低产高级醇啤酒酵母菌株及其构建方法，属于生物工程技术领域。本发明低产高级醇啤酒酵母菌株是通过敲出啤酒酵母氮分解代谢抑制基因转录的关键调控因子GAT1基因权序列来获得的。所述低产高级醇啤酒酵母菌株在以小麦为原料的发酵培养基中发酵后，较亲本菌株的高级醇总量降低了21.42％。本发明的菌株发酵性能及生长性能良好，未出现影响重组菌株生长性能或其他情况。