本发明涉及一种粪便隐血的化学法检测试纸及其制备方法，该试纸包括滤纸，滤纸的表面由里往外依次设有第一浸液固化层和第二浸液固化层；第一浸液固化层是由缓冲剂、柠檬黄、表面活性剂、螯合剂和水构成的混合液体固化而成，第二浸液固化层是由四甲基联苯胺、过氧化氢异丙苯、表面活性剂、催化剂溶于有机溶剂形成的液体固化而成。这样，该试纸即可迅速地与粪便中的血红蛋白迅速发生反应，检测效率高，色阶明显，易于目视分辨、判定患者大致的出血量，对临床用药起正确引导的作用，而且采用两步浸液制备，表面活性剂用量少，灵敏度高，测定结果快速准确，生产加工容易、成本低廉。