本发明公开了一种荧光配合物及制备方法，荧光探针及制备方法和应用。其中荧光配合物氨基化的三联吡啶四羧酸铕，其制备方法为将化合物1与N‑Boc‑丁炔‑4‑胺、CuI在惰性气氛下反应得到化合物2；将化合物2溶于CH2Cl2和CF3COOH的混合溶剂中反应得到化合物3；将化合物3与EuCl3·6H2O反应得到氨基化的三联吡啶四羧酸铕；荧光探针由荧光配合物与三聚氯氰反应得到。荧光探针可以实现对蛋白质分子的标记，具有水溶性好、稳定性高、灵敏度高、简便快速等优势，可应用于时间分辨荧光生化分析。