本发明属于生物工程技术领域，涉及一种基于CRISPR/Cas9技术的牛磺酸转运体基因敲除大鼠模型的构建方法，针对TauT基因第5外显子，选择2个sgRNA的作用靶点，合成两对寡聚核苷酸链，连入经BsaI酶切回收的pUC57‑sgRNA表达载体，构建得到sgRNA表达载体，通过体外转录获得Cas9mRNA、sgRNA，并注射到SD大鼠受精卵的雄性胞核和细胞质中，植入假孕大鼠体内，经繁殖得到TauT基因敲除大鼠模型，为进一步研究牛磺酸对大鼠神经疾病模型的影响提供可靠而稳定的基因工程模型，为研究牛磺酸对神经系统疾病的影响提供稳定的动物模型，为阐明牛磺酸对相关疾病的治疗作用等工作奠定基础。