本发明提供一种鸡新城疫、鸡传染性支气管炎、H9亚型禽流感、肉鸡呼肠孤四联灭活疫苗，本发明所提供的四联灭活疫苗，其中抗原为灭活的鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、H9亚型禽流感病毒和肉鸡呼肠孤病毒SigmaC蛋白；其中肉鸡呼肠孤病毒SigmaC蛋白的氨基酸序列为SEQIDNO:1。目前市场上出售的呼肠孤病毒灭活疫苗及本发明疫苗对SPF鸡分别进行免疫，再用本发明的SD18株及其它分离毒进行攻毒实验；结果表明目前市场上出售的疫苗的免疫效果远低于本发明的灭活疫苗的免疫效果。