本发明属于蛋白纯化技术领域，具体涉及一种重组蛋白的纯化方法，包括将重组蛋白的发酵液依次经过BlueBestarose6FastFlow层析、PhenylBestaroseHighPerformance‑硫酸铵疏水层析、BestaroseDiamondMD层析、PhenylBestaroseHighPerformance‑氯化钠疏水层析和BestaroseDEAEFastFlow层析。本发明的重组蛋白的纯化方法，提供了具有连贯性好，操作性强且杂质去除和目的蛋白回收率好的一套完整纯化工艺方法；而且，纯化获得的原液经质量检定，检定结果均符合制造与检定规程的要求。