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专利名称一种用于消除妊娠纹的间充质干细胞培养上清中细胞因子冻干粉的制备方法
申请日2019-03-14
申请号/专利号CN201910194327.X
专利权人江苏全能干细胞生物工程有限公司
申请人江苏全能干细胞生物工程有限公司
发明人/设计人徐念沁;殷勤伟;徐全成;陈文均;胡佳丽
公告日2019-08-02
公告号CN110075050A
法律状态审中
专利类型发明
行业分类生物工程

摘要

本发明公开一种用于消除妊娠纹的间充质干细胞培养上清细胞因子冻干粉的制备方法,包括以下步骤:制备原代脂肪间充质干细胞及原代脐带间充质干细胞,建立细胞库;复苏P1代脂肪间充质干细胞、P1代脐带间充质干细胞,加入生理盐水,离心,收集细胞沉淀,接种于无血清培养液中,进行铺板培养;铺板培养4‑5天后细胞密度达到70%,收集培养上清,加入EDTA重组胰蛋白酶消化细胞,培养至P5代,收集培养上清;向含P5代细胞的细胞工厂中加入生理盐水,反复冻融后与收集的P2至P5间充质干细胞培养上清混合,离心去沉淀;添加海藻糖、甘露醇和透明质酸,进行超低温抽真空冻干,得到细胞因子冻干粉。
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