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专利名称可靶向转染背根神经节卫星胶质细胞腺病毒载体构建方法
申请日2019-03-12
申请号/专利号CN201910183537.9
专利权人青岛大学附属医院
申请人青岛大学附属医院
发明人/设计人相宏飞;沈娜娜;于宏伟;陈伯华;龙云泽
公告日2019-05-03
公告号CN109706176A
法律状态审中
专利类型发明
行业分类生物工程

摘要

本发明涉及生物工程技术领域,尤其是可靶向转染背根神经节卫星胶质细胞腺病毒载体构建方法,其特征在于,取得适量pAAV‑GFAP‑EGFP表达质粒、pRep2/Cap6(pRC6)、pRC8和pHelper进行AAV病毒的生产,取得适量的AAV病毒进行梯度离心纯化,转染得到AAV载体,转染后三天,将细胞沉淀重悬于裂解缓冲液中,并通过3个循环的冻融裂解得到细胞裂解物A,进行纯化病毒载体完整性验证,分析EGFP表达的细胞特异性,评估载体注射后SGC转导的比率,得到结果。本发明成功构建含有GFAP启动子的AAV载体,AAV载体因安全性较高已经被美国FDA批准可供人体内使用,该载体能特异性在DRG内转染SGCs,为后续基因治疗创造了条件,提高了安全性,促进神经性疼痛的治疗手段的进步,减轻了患者的负担。
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