本发明涉及一种甲功五项的荧光微球联合检测装置及其制备方法，属于医疗检测设备领域。样品垫、免疫荧光交联抗体玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜、吸收垫分别粘贴在塑料板，所述硝酸纤维素膜的两端分别与吸收垫、免疫荧光交联抗体玻璃纤维膜搭接，免疫荧光交联抗体玻璃纤维膜另一端与样品垫搭接；所述硝酸纤维素膜上设置检测线T和质控线C；检测线分别标记甲状腺素抗体、三碘甲状腺原氨酸抗体、促甲状腺激素抗体，质控线C上喷点羊抗鼠IgG多克隆抗体。优点是将甲状腺素、三碘甲状腺原氨酸和促甲状腺激素抗体包被于硝酸纤维膜膜上，特异性强，能同时检测标本中T3抗体、T4抗体、TSH抗体、游离T3抗体、游离T4抗体，操作简便，实用性强。