本发明公开了一种液体乳酸链球菌素制备方法，属于生物食品添加剂领域，包括以下步骤：将发酵完成的乳酸链球菌素发酵液进行泡沫分离；收集泡沫浓缩液，并进行消泡处理，得到不同浓缩倍数的浓缩液；调节浓缩液的pH；将调节pH后的浓缩液加热至一定温度，并维持一段时间；通过陶瓷膜对浓缩液进行过滤，得到陶瓷膜滤液；对陶瓷膜滤液进行温度处理，向其中加入保护剂至完全溶解，混匀，即得液体乳酸链球菌素。本发明提供了一种使用方便、提取收率高、能耗低和污染小的液体乳酸链球菌素制备方法。