本发明公开了一种液态25‑羟基维生素D校准品稀释液包含以下组分：缓冲液、蛋白质类稳定剂、防腐剂、环戊烷多氢菲类稳定剂。本发明的主要创新之处在于：a)首次将7‑脱氢胆固醇应用于25‑羟基维生素D校准品稀释液，用于提升25‑羟基维生素D在液态有氧条件下的稳定性；b)校准品稀释液中的所有组分均是最优配方，给25‑羟基维生素D校准品的稳定性提供了有力保障，在2‑8℃条件下可稳定保存12个月；c)将液态25‑羟基维生素D校准品用于血清样品中25羟基维生素D的检测，检测时无需进行校准品复溶，且多次定标的校准曲线可重复性优于冻干校准品的校准曲线。