本发明实施例涉及免疫检测领域，具体涉及一种高灵敏度、宽检测范围的人肝素结合蛋白测定试剂盒。所述人肝素结合蛋白测定试剂盒包括：试剂1、试剂2和不同浓度梯度的人HBP校准品；其中，试剂2包括只标记有人HBP单克隆抗体的羧基胶乳微球和只标记有人HBP多克隆抗体的羧基胶乳微球，所述只标记有人HBP单克隆抗体的羧基胶乳微球的平均粒径＞只标记有人HBP多克隆抗体的羧基胶乳微球的平均粒径。本发明提供的人肝素结合蛋白测定试剂盒，在10min内即可完成单样本的检测，精密度、准确度和抗干扰等各项指标都表现优异，应用于临床，能很好地预测由脓毒症引起的器官功能障碍，可作为脓毒症、特别是严重细菌感染的早期诊断标志物。