本发明公开了一种脂肪干细胞和脐带间充质干细胞的成软骨诱导方法，包括脂肪干细胞和脐带间充质干细胞的分离、脂肪干细胞和脐带间充质干细胞的培养、诱导生产无软骨组织的软骨细胞、诱导生产具有一定形态的软骨组织和诱导生产软骨组织。本发明的有益效果是：用浓度为0.1%的Ｉ型胶原酶与细胞组织混合，使得组织消化更彻底，细胞组织均剪为1立方厘米的小块组织，使组织能够分离完全，脂肪干细胞和脐带间充质干细胞均处于温度设有37℃，且内部充有含量为5%CO2气体的培养箱内进行培养，满足细胞生长繁殖所需环境及温度，藻酸盐在钙离子存在时可通过离子交联作用形成开放晶格的凝胶，具有三维高孔隙率结构，在三维结构中可以保存大量细胞。