本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种阻断PD‑1/PD‑L1通路的IgY及其Fab小分子抗体、制备方法和应用。本发明所制得的IgY及其Fab小分子抗体性能稳定，可以加至病灶处或通过病灶部位的组织液渗透进入粘膜层、外周组织和淋巴组织以及毛细血管后微静脉等微循环而与T细胞表面的PD‑1蛋白和肿瘤细胞表面的PD‑L1蛋白结合，阻断PD‑1/PD‑L1通路，激活T细胞攻击肿瘤细胞并将其将其杀死；最适合用于治疗早期癌症即粘膜上皮层内的“原位癌”的药物，第一时间阻止癌细胞侵破基底膜向下浸润生长而扩散。本发明将这些抗体纳米脂质体化并配合使用“皮肤渗透促进剂”，提高生物利用度和治疗指数。另外，IgY及其Fab小分子抗体外用不具免疫原性，可以制成外用或口服和喷雾制剂。