本发明的一种酯化红曲的培养基的制备方法，属于生物工程技术领域。本发明以菜籽皮、菜籽粕和玉米粉为主要原料，通过试管斜面菌种的制备、三角瓶菌种的制备、生产用菌种的制备、准备发酵基料、拌种、打堆发酵、摊堆发酵、低温烘干的工艺步骤得到得酯化酶粗酶制剂，即为酯化红曲的培养基。本发明的一种酯化红曲的培养基的制备方法，可以提高红曲酯化力，工艺简单，成本低。