本发明公开了一种胃蛋白酶原Ⅱ检测试剂盒，包括包被有胃蛋白酶原Ⅱ单克隆抗体的磁微粒，含有辣根过氧化物酶（HRP）标记胃蛋白酶原Ⅱ单克隆抗体的酶稀释液，含有胃蛋白酶原Ⅱ抗原的校准品及样品稀释液；所述样品稀释液中含有阻断剂成分；所述阻断剂为一种或多种中和HAMA干扰的人抗鼠抗体。本发明的优点在于将高灵敏度的化学发光技术和磁微粒制备技术相结合，配套使用AutoLumo全自动检测分析仪，实现了检测全自动化；同时在样品稀释液中添加了阻断剂成分，可消除样本中嗜异性抗体，大大提高了试剂盒的抗干扰能力。