本发明涉及一种生物猪粪发酵剂的配制方法，其配方(按重量百分比)玉米低聚肽粉1－2%、嗜热侧孢霉0.8－1.8%、甲酸0.7－1.8%、米曲霉2.3－3.3%、杜仲提取物2.2－3.2%、磷酸二氢钠1.9－2.8%、焦磷酸钠1.8－2.8%、蓍草2.5－3.5%、鸡胶原蛋白2.6－3.6%、大豆异黄酮1.2－2%、景天三七1.1－2.1%、短小芽胞杆菌2.1－3.1%、丙酸铵0.6－1.6%、蒲黄0.3－1.3%、固氮放线菌0.2－1.2%、地衣芽胞杆菌0.7－1.7%、血竭0.5－1.5%、燕麦葡聚糖0.9－1.9%、水76.6－58.8%。本发明具有较好的杀灭有害菌、寄生虫卵，提高抗病、抗旱、抗寒能力，增加基土养分，提高土壤微生物活性。