本发明提供了一种HBcAg‑VLP或HBcAg‑VLP衍生物的纯化方法，所述方法包括如下步骤：将含有HBcAg‑VLP的上样液或HBcAg‑VLP衍生物的上样液使用疏水作用层析填料处理得到纯化的HBcAg‑VLP或纯化的HBcAg‑VLP衍生物；本发明所提供的纯化方法，克服了步骤繁多、收率较低、耗材昂贵等现有方法存在的问题，仅需要一步疏水层析即可实现纯化，在不使用凝胶过滤的精制方法处理时，收率最高可达到90％以上，纯度最高可达到86％左右，大大提升了纯化效果，如果辅以进一步的凝胶过滤等精制纯化的方法，其纯度可达到99％以上，具有良好的应用前景和非常高的应用价值。