本发明公开了一种同时检测呼吸道多种病原的试剂盒，包括PCR反应液，所述反应液中包括针对嗜肺军团菌、博卡病毒、人偏肺病毒基因组保守区的引物，各引物的序列为SEQIDNO.1~9。本发明的优点在于利用多重实时荧光定量PCR检测技术，实现了同时检测嗜肺军团菌、博卡病毒、人偏肺病毒三种呼吸道病原的目的，简化了实验过程，能够极大的提升检测效率，大大节约检测成本，同时能够辅助医生进行诊断，使医生的治疗更加有针对性和目的性。