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专利名称一种利用pBV220表达载体高效表达色氨酸合成酶的方法
申请日2018-08-16
申请号/专利号CN201810933153.X
专利权人湖北大学;湖北新生源生物工程有限公司
申请人湖北大学;湖北新生源生物工程有限公司
发明人/设计人陈诚;马立新;袁劲松;刘洋;甘飞;王亚平
公告日2019-01-11
公告号CN109182318A
法律状态审中
专利类型发明
行业分类生物工程

摘要

本发明提出了一种利用pBV220表达载体高效表达色氨酸合成酶的方法。其步骤为以trpBA‑pET28a重组质粒为模板,并以PCR方法扩增出紧密连锁的色氨酸合成酶基因trpBA片段;构建重组质粒trpBA‑pBV220;按常规转化大肠杆菌,在37℃条件下培养,并对其进行42℃的高温诱导表达,得到有色氨酸合成酶活性的工程菌。本发明通过调节诱导温度成功诱导表达具有生物活性的色氨酸合成酶。其重组菌株较trpBA‑pET28a重组菌株生物量高,且无需使用化学诱导剂,所表达的色氨酸合成酶以可溶性的形式存在,这极大的降低了色氨酸合成酶的生产成本,为提高大规模工业生产的效益奠定了基础。
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