本发明涉及一种胃癌靶向重组免疫毒素的快速纯化方法，属于生物工程领域。利用已构建并筛选的可高效表达可溶性rG17PE38KDEL的重组大肠菌株，优化大体积培养条件，扩大培养诱导体积至1L，1％接种量接种于LB培养基中，37℃摇培2h后加入0.5mM诱导剂IPTG，180rpm/min16℃摇培16h，所表达蛋白65％以上为可溶状态；通过超声破碎法获得可溶性蛋白后，通过三步层析方法得到较高纯度与活性的重组毒素rG17PE38KDEL，获得可用于药物评价的具有良好活性的高纯度毒素，纯化过程后得到的胃癌靶向重组免疫毒素rG17PE38KDEL的纯度可达95％以上，纯化后重组毒素rG17PE38KDEL可以与肿瘤细胞表面CCK2R结合，并杀伤该类靶向肿瘤细胞。