本发明公开了一种蘑菇中提取真菌壳聚糖的方法及应用，包括以下步骤：S1：称取适量的蘑菇，加入乙醇溶液，对混合物进行回流预处理，干燥后粉碎得到预处理蘑菇粉末；S2：将步骤S1制备的蘑菇粉末加入酶，并用溶剂水搅拌混合后酶解，得到混合物；S3：将步骤S2得到的混合物，加入稀盐酸混合均匀，一定温度下，浸泡一定时间后，水洗至中性，离心，干燥，得到真菌壳聚糖粗品；S4：将步骤S3得到的壳聚糖粗品加入氢氧化钠混合均匀，一定温度下浸泡一定时间，离心后水洗至中性，干燥，得到高纯度的真菌壳聚糖。本发明从平菇细胞壁中提取的水溶性真菌壳聚糖，具有广谱抑菌，减缓氧化和维生素降解功效，成膜性好，延长食品保质期。