本发明提供了一种抗PD‑L1人源化纳米抗体及其应用。具体地，本发明提供了一种抗蛋白程序性死亡配体1(PD‑L1)的纳米抗体。本发明提供的抗PD‑L1纳米抗体能有效阻断PD‑L1与程序性死亡分子1(PD‑1)的结合，因此可成功阻断PD‑L1对表达PD‑1的T细胞的抑制作用。本发明PD‑L1纳米抗体可应用于PD‑L1相关疾病的预防、诊断、治疗。本发明还提供了人源化的PD‑L1纳米抗体序列，人源化后的纳米抗体仍具有阻断PD‑L1与PD‑1结合的功能，并具有高亲和力及高特异性，可作为肿瘤免疫靶点抗体药物。