本发明公开了一种表达红曲霉菌Mn‑SOD的大肠杆菌工程菌株的构建及表达方法，属于生物工程领域。本发明通过筛选并设计出红色红曲霉Mn‑SOD简并引物，利用PCR技术扩增红曲霉Mn‑SOD基因的全长序列，经EcoRI和HindIII酶切后连接至相同酶切的表达载体pET21a及pET28a，并分别转化至E.coliBL21，均实现合成酶基因在E.coli中的表达，得到具有酶活力和耐酸性的Mn‑SOD。本发明将红曲霉Mn‑SOD歧化酶基因导入到原核生物中实现表达，为红曲霉Mn‑SOD歧化酶的大规模生产、分离提供了可能，且本发明构建的工程菌分泌的MnSOD来源于红色红曲霉，在pH3.8条件下处理1h仍具有80%的活性，具有耐酸性，可用于耐酸性超氧化物歧化酶的生产菌株。