本发明涉及生物工程技术领域，具体公开一种高产L‑丙氨酸的基因及其工程菌的构建方法。所述构建方法，包括如下步骤：敲除大肠杆菌染色体的丙氨酸消旋酶基因、D‑乳酸脱氢酶基因及丙酮酸甲酸裂解酶基因；按大肠杆菌密码子偏好，将具有丙氨酸合成能力的L‑丙氨酸脱氢酶基因进行优化处理后，和L‑丙氨酸外运蛋白基因整合到大肠杆菌染色体上；所得到的大肠杆菌进行连续传代培养，得到高产L‑丙氨酸的基因工程菌。本发明提供的高产L‑丙氨酸的基因工程菌的构建方法，提高基因表达效率，增加丙氨酸积累量，提高最终丙氨酸的产量。