提供了一种使用β‑葡萄糖苷酶制备宝藿苷Ⅰ的方法，包括用β‑葡萄糖苷酶催化底物水解制备宝藿苷Ⅰ，底物为淫羊藿提取物、淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、箭藿苷A和箭藿苷B中的任意一种或多种，所述β‑葡萄糖苷酶具有如SEQIDNO：2所示的氨基酸序列。该方法能够将淫羊藿、朝藿定A、朝藿定B、箭藿苷A及箭藿苷B全部水解成宝藿苷Ⅰ，提高了淫羊藿提取物的有效利用率，大大降低了宝藿苷Ⅰ的制备成本。还提供了所述β‑葡萄糖苷酶以及含有所述β‑葡萄糖苷酶基因的微生物菌株在催化淫羊藿提取物、淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、箭藿苷A和箭藿苷B中的任意一种或多种水解，制备宝藿苷Ⅰ中的应用。