本发明公开了一种抗PCV2单克隆抗体的制备方法及其应用。公开该抗PCV2单克隆抗体及其重链可变区和轻链可变区的DNA序列和氨基酸序列。设计了所述的抗PCV2单克隆抗体的制备方法。将所述单克隆抗体在抗原/抗体检测试剂盒、抗原/抗体免疫层析试纸以及IFA、IPMA中和PCV2或PCV2 Cap的免疫亲和柱中应用。本发明的单克隆抗体能够同时识别PCV2a和PCV2b这两种主要的流行亚型，与PCV2全病毒以及PCV2 Cap蛋白都具有良好的反应原性，而与PCV1、PCV3亚型和猪源病毒均无交叉反应；为进行PCV2病原学和致病机理的研究及PCV2病原的临床检测研究奠定了基础。