本发明涉及人羊膜上皮干细胞向黑色素细胞诱导分化培养基及其方法。在α‑MEM基础培养基中添加内皮素3,地塞米松，干细胞因子，碱性成纤维细胞生长因子，胰岛素铁硒传递蛋白和胎牛血清。方法是将人羊膜制成人羊膜上皮干细胞悬液；将细胞置于添加内皮素3,地塞米松，干细胞因子，碱性成纤维细胞生长因子，胰岛素铁硒传递蛋白和胎牛血清的α‑MEM培养基中；在37℃，5% CO2培养箱中培养成羊膜上皮干细胞贴壁单层，逐渐诱导分化成表达黑色素细胞标记基因酪氨酸酶相关蛋白l（trp1），2（trp2）、小眼畸形相关转录因子（mitf）、酪氨酸酶（dtc）阳性的黑色素细胞。具有细胞来源丰富、免疫原性低，不受伦理限制，诱导方法简便的特点。