本发明公开了一种贴壁细胞和悬浮细胞共培养的细胞培养瓶，包括瓶身、瓶身设有瓶口、瓶盖，所述的瓶身内设有纳米半透膜，纳米半透膜将瓶身内的空间隔成两个部分，分别用作为贴壁细胞的培养容器、悬浮细胞的培养容器，瓶盖为透气性瓶盖。本技术方案的两种细胞操作时相互不影响，但两种细胞之间分泌的细胞因子的可以通过纳米半透膜相互作用，在一定意义上真实反应两种细胞之间的相互作用和影响。