本发明公开一种替代抗生素的添加剂、制备方法及其应用，包括粉末和菌悬液，具体步骤：1)粉末的制备：按重量份计，选用猪苓3份、茯苓3份、麦芽1份，三者混合打粉，分装保存，备用；2)菌悬液的制备：将已活化的短小芽胞杆菌和巨大芽胞杆菌，分别接种于牛肉膏蛋白胨液体培养基，于37℃环境下150r/min培养72h，取菌液100mL以6000r/min离心5min，弃去上清液，将下部沉淀用生理盐水稀释成1×105cfu/mL的菌悬液，备用。本发明仅仅选用了3味中草药，配伍鸡体内的芽孢杆菌即可提高鸡体免疫力，能够有效控制草鸡养殖中沙门氏菌病、大肠杆菌病等常见疾病的发生，取得了显著的替代抗生素的作用。