本发明涉及一种粪便样本检测试纸及其制备方法，该检测试纸包括有基片，基片的表面上下两端分别设有空白块和黑色识别区，所述空白块和黑色识别区之间设有间隔设置的pH试纸块和乳糖试纸块。其中，pH试纸块是浸湿有pH试纸原液、并烘干和贴双面胶后切割成型的滤纸，乳糖试纸块是浸湿有由乳糖试纸原液、并烘干和贴双面胶后切割成型的滤纸，分别用来检测婴幼儿粪便样本的pH值和乳糖的含量，并通过乳糖与pH的检测结果共同判定是否乳糖不耐受，同时通过在基片上设置的空白块消除粪便样本颜色产生的显色差异的影响。该粪便样本检测试纸的结构简单，加工难度和成本低，且分析结果准确度、精确度高，可快速判断检测结果，有利于广泛推广使用。