本发明涉及一种哺乳动物细胞表达的黄花蒿主要致敏蛋白Art a3，编码基因、表达方式、纯化工艺，以及重组蛋白检测方法和应用。黄花蒿致敏蛋白本身属于植物蛋白，在现有常用的原核或真核表达系统中表达都有一定困难，也并未见相关文献公开；而传统的提取方式常存在着成分复杂、质量难以控制、易受到外源性有毒物质、病原体微生物的污染等问题。为此，本发明提供了如SEQ ID NO：1所示的重组Art a3的编码基因，以及专为此设计的表达、纯化、重组蛋白检测方法及应用，与现有技术相比，本发明的重组Art a3具有较高的表达量及活性，同时也为该药品开发过程中细胞株开发、工艺优化、临床前和临床研究以及工业化生产建立了基础。