本发明公开了一种L‑木糖的酶法制备方法，属于生物工程领域。本发明将2‑酮基‑L‑古龙酸溶于含有镁离子和焦磷酸硫胺素的缓冲液中，再向缓冲液中加入丙酮酸脱羧酶，在适宜的温度下进行酶催化反应，反应结束后利用高效液相色谱仪检测，证明有L‑木糖的生成。采用本发明方法，找到一种新的生产L‑木糖的方法，原料成本低，对环境无污染，具有重要的经济效益和社会效益。