一种高产丁酸梭菌的发酵生产工艺，在厌氧条件下，从菌种保存培养皿上挑取丁酸梭菌菌株至活化液中，在厌氧、30℃‑37℃下培养24h‑36h；将制备好的丁酸梭菌活化液接种到发酵罐的发酵培养基中，在温度为30℃‑37℃下进培养，作为二级培养种子液,接种到发酵罐的发酵培养基中，在30℃‑37℃下进行一级种子液培养，发酵结束后，收集二级发酵种子液,接种至发酵罐中，进行发酵培养，发酵温度30℃‑37℃，培养全程通入氮气，发酵结束后，收集罐内发酵液。优点是：将丁酸梭菌经优化菌种活化，发酵工艺优化控制，确立了稳定的产业化发酵生产工艺，发酵后可生产出发酵活菌数高，大大减少了丁酸梭菌的生产成本，适合工业规模化生产。