本发明公开了一种采用培养法区分脲原体中解脲脲原体和微小脲原体的方法，首先确定两个检测微孔，记为甲孔和乙孔；甲孔内加入适量葡萄糖或/和脲酶抑制剂，乙孔中加入锰镁溶液，干燥后使葡萄糖或/和脲酶抑制剂附着在甲孔内壁上，锰、镁离子附着在乙孔内壁上；将待测样本加入脲原体培养基中，混合均匀后分别加入到甲孔和乙孔中，37℃培养24~48小时；根据甲孔和乙孔的变色情况即可确定样本中是否含解脲脲原体和微小脲原体。按照本发明方法制备成试剂盒更加方便使用。本发明的鉴定方法操作简单，一步即可精确区分标本中是否包含微小脲原体和解脲脲原体，同时能与药敏检测结合在一起，同时做出鉴别和药敏结果；鉴定结果直观、精确，方便临床推广使用。