本发明涉及一种蟾毒色胺及其季铵盐的合成方法，其涉及步骤简单，操作安全方便，反应效率高，易于纯化分离，条件温和，成本低，蟾毒色胺及其季铵盐的反应总收率分别大于65％，60％，合成产品纯度高(＆gt;99.0％),适用于工业化生产。通过大量实验筛选，结合热痛和机械痛行为学评价与磷脂组学评价，对几种色胺类成分的活性比较，发现蟾毒色胺季铵盐具有最优的镇痛作用，并与吗啡具有协同增效作用。