生物质分解菌的制备方法，包括斜面培养基的制备及菌种培养、发酵培养基的制备及培养、发酵液制备和分解菌的制备，其中斜面培养基的制备及菌种培养包括：葡萄糖1.0%，氯化钠0.5%，蛋白胨0.7%，磷酸氢二钾0.2%，七水合硫酸镁20.03%，琼脂粉1.5%，麦芽糖1.5%，酵母浸膏0.4%，余量为水；发酵培养基的制备及培养包括：麸皮5.0%，尿素0.25%，氯化钠0.5%，磷酸氢二钾0.2%，磷酸二氢钾1.0%，维生素B10.03%，余量为水。本发明菌种具有高耐碱、繁殖快、产酶量大优点，微生物生长良好，菌株不易退化，产生的酶可直接作用于各种生物质表面，破坏表面的蜡质和木素，在外界电荷、化学原料的干扰下，使生物质木素迅速游离，为纤维分离和机械处理和化学处理创造前期条件，真正做到节能降耗。