本发明属于医药技术领域中虎舌红素Ｂ的制备方法与用途，由虎舌红全株或枝叶或根茎为药材，用水、任意比例的甲醇水溶液、乙醇水溶液或有机溶媒提取，提取液过滤浓缩；浓缩物经大孔树脂、柱层析（氧化铝或硅胶）色谱法单独或联合分离后，再重结晶精制而成。本发明的优点是：提供了可用于抗肿瘤、抗炎、镇痛、抗病毒（如流感病毒、疱疹病毒、肝炎病毒、及包括ＨＩＶ在内的反转录病毒等）的虎舌红素Ｂ的制备方法，其成本低，工艺稳定，收率为干燥药材的１％以上，可以得到除去大量杂质的高纯度的虎舌红素Ｂ，并且药理活性显著。