本发明涉及一种检测膀胱癌的胶体金试纸卡及其制备方法，该试纸卡包括底板及依次粘贴在底板上的样品垫、胶体金垫、层析垫、吸样垫；所述层析垫的两端分别搭接有胶体金垫、吸样垫，所述胶体金垫的另一端插入样品垫中；所述胶体金垫上包被有由胶体金与兔抗APOA1多克隆抗体结合而成的金标抗体复合物；所述层析垫上包被有抗APOA1单克隆抗体和抗APOA1多克隆抗体的二抗。本发明可以实现对膀胱癌的检测，快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好，而且结果判断直观可靠、容易被基层单位人员掌握，同时也方便病人对病情的自我监测，减少病人有创性检查。为膀胱癌的诊断提供可靠的依据，有望成为诊断膀胱癌的新方法。