本发明提供了一种新型平铺光片选择性平面照明显微镜，包括激光光源系统、扩束准直系统、空间光调制系统、第一4f系统、扫描振镜、反射镜组、左4f系统、右4f系统、左激发物镜、右激发物镜、检测物镜、筒镜、探测器、置于样品室内的3D平移台及控制单元，控制单元分别与激光光源系统、空间光调制系统、扫描振镜、探测器和3D平移台控制连接，控制单元向空间光调制系统传递不同相位图，改变激发光束焦线尺寸及位置，在探测器视场内平铺光片，通过改变扫描振镜角度位置，对样品左右两侧分别3D图像采集，左右拼接方法完成3D成像，本发明克服了空间分辨率、光学层析能力和视场之间矛盾，提高了空间分辨率和光学层析能力，优化实时成像性能。