本实用新型提供了一种活组织切片小室和倒置显微镜观测系统及膜片钳系统，涉及组织切片观测设备技术领域，活组织切片小室包括依次连通的进液槽、切片放置槽和吸液槽，切片放置槽的底部设置有观测孔，观测孔上固定有爬片，爬片用于放置活组织切片，改善了传统活组织切片记录和成像会使用普通细胞培养的器皿或载玻片，灌流或不灌流均会影响记录和成像效果的技术问题，本实用新型提供的活组织切片小室使得活组织切片放置于切片放置槽中的爬片上，活组织切片能够在持续灌流的过程中进行记录和成像，有效防止灌流液体对活组织切片的扰动及液体的吸干，同时加药后也易于清洗，保证了活组织切片的记录和成像效果。